肿瘤相关抗原125(CA125)定量测定试剂盒(化学发光法)
【生产厂家】厦门市波生生物技术有限公司
【批准文号】国药准字S0095
【剂 型】试剂盒
【规 格】96人份
【医保类型】
【国家基本药物】否
【英文名】The Quantitative Determination Kit for Cancer Antigen 125 (CA125) with Chemiluminesent Immunoassay（CLIA）
【汉语拼音】Zhongliu Xiangguan Kangyuan 125 Dingliang Ceding Shiji He (Huaxue Faguang Mianyi Fa)
【使用目的】
用于血清或肝素抗凝血浆样品中肿瘤相关抗原125（CA125）的定量测定。
肿瘤相关抗原125(CA125)是重要的肿瘤标志物之一，属高分子糖蛋白复合物，分子量200-1000kD。CA125主要存在于胚胎发育的体腔上皮细胞及苗勒氏管中，于出生后消失。当这些器官发生病变时血清CA125相应升高，尤其以卵巢癌变时升高为显著。正常人血清CA125含量小于35U/ml。血清CA125含量的改变与癌症分期密切相关，患者手术前后CA125含量的变化也十分明显。因此，血清CA125检测对卵巢癌的辅助诊断、治疗监测和预后判断等有重要意义。
【试验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心法原理。用鼠抗CA125单抗包被，羊抗CA125多抗标酶。样品及抗CA125(羊抗)-碱性磷酸酶（ALP）标记物加到有固相抗CA125（单抗）的白色不透明条板微孔中，反应足够时间后，CA125分子与固相抗体及抗CA125-ALP标记物特异性结合，洗掉游离成份。加入发光底物液（CSPD），ALP催化底物脱磷酸基，并发出463nm的可见光。于第10-20分钟测定各样品孔发光值RLU。样品RLU与CA125浓度呈正相相关。样品的CA125浓度依据由校准品CA125浓度和对应的RLU建立的Cubic Spline方程进行定量。
【试剂主要组成成份】
1．CA125预包被板（鼠抗CA125单克隆抗体包被）6×8，12×8
2．抗CA125-ALP标记物（碱性磷酸酶标记羊抗CA125多克隆抗体） 1瓶，8.5ml/瓶
3．CA125校准品：500、150、50、25、5、0U/ml 各1管，装量0.3ml/管
4．CA125质控物（Q1、Q2） 各1管，装量0.3ml/管
5．浓缩清洗液（20×） 1瓶，20ml/瓶
6．发光底物液1瓶，5.5ml/瓶
7．样品稀释液1瓶，10ml/瓶
8．说明书 1份
9．自封袋 1个
【适用仪器】
适用于具备如下性能指标的发光测定仪：
1.孔间交叉〈3×10-5；
2.线性测定(线性回归,r>0.9900)范围1×105；
3.本底读数<150,最高RLU读数>1×106；
4.于29℃室温环境,最低检出量≤2.67×10-18M ALP；
5.96孔连续读数完成时间:150秒≤96孔读数完成时间≤200秒。
【样本要求】
1．所用样品为血清或肝素抗凝血浆；
2．样品必须是过夜禁食(12小时)后空腹采集，并在采集后的24小时内分离完毕；
3．样品应充分离心，不应有溶血及细胞颗粒；
4．样品在2～8℃环境密封，可保存7天供待检，不能及时检测，可密封置-20℃存放保存1年。
【试验方法】
1．准备：自2-8℃冰箱取出试剂，室温平衡15分钟；浓缩清洗液用用煮沸并预冷的纯化水按1:20稀释成工作液。
2．加样品、校准品、质控物及抗CA125-ALP标记物：待测样品、校准品及质控物分别定位于微孔条板。待测样品、校准品系列及质控物Q1、Q2每孔加20ul，然后各孔加入抗CA125-ALP标记物80ul，混匀。
3．温育：置37℃恒温反应60分钟。
3.洗板：吸除板孔中的反应液，各孔加入洗液约300ul，静置20秒左右，除去其中液体。如此共洗5次,最后一遍将板中液体拍尽。
4.加发光底物液：开启发光测定仪及主控制计算机,预热15分钟。设定测定模式与参数。将微孔板置发光测定仪测定室，用内置加样器加发光底物液，每孔50ul。详见发光测定仪操作指南。
5.测定RLU：于室温25℃左右,设定每孔测定1秒钟。在加发光底物液后的第10-20分钟测定各孔的发光值RLU。并将数据转至定量软件。
6.定量方法:根据各校准品测定的RLU，用Cubic Spline方程建立CA125浓度—RLU的回归方程和绘制校准曲线。根据各样品RLU值，由定量软件直接计算转换成其相应的CA125浓度。存入CA125文档，再输入至病人的检测报告单。
【对试验结果的解释】
病人的检测结果依据各医院用本方法建立的CA125正常值范围判定。高于正常范围，判定为阳性；低于正常值范围，判定为阴性。判定为阳性者需进一步检查明确病因。
正常参考值范围(95%可信上限):＜35.0U/ml。各实验室应建立本方法CA125正常值范围。
【该试验方法的局限性】
1.本法测定结果仅适合于用本方法建立的正常值范围来判定，与其他方法结果无直接可比性。
2.接受鼠单抗制剂诊断或治疗的个体,体内可能含有抗鼠抗体(HAMA)而影响检测结果的准确性,建议排除鼠抗体阳性后用本法,否则测定结果不可信。
3.本品只能用于血清或肝素抗凝血浆样品的测定。
4．溶血样品或高血脂等异常样品可能会造成测定结果的偏高或偏低。
【产品性能指标】
1．检测范围:1.0～500.0U/ml；
2．分析灵敏度:＜1.0U/ml；
3.功能灵敏度:0.31U/ml；
4．特异性
4.1交叉反应
CA125 CLIA试剂交叉反应
交叉因子 交叉因子试验浓度交叉因子相当于CA125的量
CA50 250U/ml ＜3.0U/ml
CA199120U/ml ＜1.0U/ml
CEA 640U/ml ＜0.5U/ml
白蛋白200mg/ml ＜3.0U/ml
胆红素1mg/ml ＜1.0U/ml
血红蛋白 100mg/ml ＜3.0U/ml
4.2干扰因子:浓度为100mg/dl的甘油三酯对血清标本测定结果的干扰率为9.47%。
5．精密性
分析内CV＜15.0%；分析CV＜20.0%。
CA125 CLIA试剂分析内精密性
CA125质控物 均值标准差SD CV
(U/ml) (U/ml)(n=10) (n=10)(%)
QCⅠ 9.8930.461 4.66
QCⅡ 30.1141.081 3.59
QCⅢ 68.6233.268 4.76
QCⅣ 242.864 9.848 4.06
CA125 CLIA试剂分析间精密性
CA125质控物 均值标准差SDCV
(U/ml) (U/ml)(n=30) (n=30) (%)
QⅠ9.752 0.504 5.17
QⅡ29.545 1.226 4.15
QⅢ69.884 3.395 4.86
QⅣ245.36010.747 4.38
6．回收率 100±10%
CA125 CLIA试剂回收率
样品 样品浓度 添加浓度 测定浓度回收率
(U/ml) (U/ml) (U/ml) (%)
1 7.3132.55910.479 108.3
25.304 32.223 94.61
74.583 82.199 104.1
2 16.084 2.55918.786 105.6
25.304 40.050 94.47
74.583 91.839 101.6
7．CA125 CLIA试剂与Abbott Axsym CA125试剂比较
YCLIA=1.0429XAxsym+ 3.5442 a=3.5442, b=1.0429, r=0.9792, n=282。
8．样品稀释情况:含量高于500U/ml的样品按1:100稀释后检测；
9．环境污染:无。
【注意事项】
1．检测结果的质量控制
1.1平行检测质控物Q1、Q2，结果应在Q1：12.43～17.99U/ml，Q2：177.0～230.94U/ml范围内；
1.2校准品曲线（5-500U/ml范围内）线性相关系数r≥0.9900；
1.3校准品发光值递进比
CA125 CLIA试剂校准品发光值递进比及其99%可信区间
剂量组(U/ml) RLU比值99%可信限区间
500/150 2.63-3.82
150/50 2.77-3.53
50/254.07-6.37
25/54.17-6.17
5/0 3.43-15.28
各剂量组发光值递进比应在此99%可信区间范围内。
如不同时符合上述条件，该试验无效。
2.本品仅供体外诊断用；
3．试剂启用后应尽快用完，不同批号试剂组分请勿混用。用时请将瓶内容物混匀；
4.免疫反应过程中，务必保持温度恒定准确，控制于37℃；
5.稀释浓缩洗液的纯化水，用前必须煮沸并冷却以灭活其中的细菌磷酸酶；
6.洗板机洗板，每孔注液约300ul，洗板5次，浸泡20秒左右，并检查加液头是否堵塞；
7.手工洗板，勿用带纸屑的吸水材料，防止磷酸酶与底物发生反应，影响检测结果的准确性；
8.加发光底物的加样器吸量应准确，加样器头应经过高压灭菌，并干燥保存。在加发光底物的过程中应避免加样器吸头与板孔或手指接触，以防止底物受到污染；
9.用发光测定仪自动进样器加发光底物时,每天应用空白废弃条一孔检测加样体积是否为设定的50ul,如不够,应该使用Prime功能排气,确保加样体积准确；
10.发光测定仪完成加发光底物模式后,应立即将模式设定为读RLU模式,以防止重复加发光底物液；
11.临床标本均应视为有潜在传染性，请按传染疾病实验室检查规程操作；
12.每个实验室在长期实践中应建立本方法自己的正常值范围。
【包装、规格】
96人份/盒
【贮存】
2～8℃，避光防潮。
【有效期】
12个月。
【批准文号】
【生产企业电话与传真】
厦门市波生生物
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