细胞外囊泡（EV）可以代表肿瘤相关抗原的富集传递给树突状细胞（DC）以引发抗肿瘤的免疫应答反应。 树突状细胞（DC）捕获和摄取细胞外囊泡（EV）是以受体介导的聚糖依赖性反应，但胶质母细胞瘤细胞外囊泡（EV）的聚糖组成是未知的。
胶质母细胞瘤细胞外囊泡（EV）缺乏能够结合树突状细胞特异性细胞间粘附分子-3-抓取的非整合素n (DC-SIGN, CD209)的糖基聚糖。
细胞外囊泡（EVS）是由脂质双层组成的膜颗粒，其中含有大量功能蛋白、RNA分子和代谢物。包括胶质母细胞瘤细胞在内的所有细胞都会产生EVS，从而释放出一小包信息，并传递给靶细胞。虽然受体细胞可以通过膜融合或内吞来捕获和摄取EV，但有几项研究报告说，受体介导的EV摄取是以糖基依赖性的方式进行的。
尽管中枢神经系统（CNS）被认为具有免疫豁免特权，但这一看法现在已经发生改变，如在免疫治疗中存在两个关键方面的空间：抗原特异性T细胞的CNS浸润和引流淋巴系统。由于这种发现，增强T细胞渗透并杀死胶质母细胞瘤已成为一种有吸引力的免疫治疗选择。已经出现了不同类型的免疫疗法，包括基于肽的疫苗，自体疫苗，检查点抑制树突细胞（DC）和T细胞。
树突状细胞（DC）是抗原呈递细胞（APC），具有诱导针对病原体和癌症的抗原特异性适应性免疫应答的能力。在稳态条件下，未成熟的DC存在于淋巴结和外周组织中并对环境进行采样。在识别抗原并结合模式识别受体刺激后，DC成熟并且抗原被处理以分别通过主要组织相容性复合物（MHC）I类和II类分子呈递给CD8 +和CD4 + T细胞。
超速离心从两个胶质母细胞瘤细胞系的细胞培养基中分离出包括外来体和小膜萌芽囊泡的小型EV。通过免疫TEM对CD63成像制剂。制剂中的一部分EV显示出CD63免疫阳性。通过CD63ELISA在滴定吸附至固相的EV上证实CD63在EV中的表达。TEM图像也证实了EV的典型形态。通过在8个TEM图像中随机选择的EV测量直径来量化的尺寸分布曲线。
研究胶质母细胞瘤（U87和GBM8）衍生的EV的凝集素结合谱。凝血酶结合试验滴定吸附在固相上的U87 的EV显示胶质母细胞瘤EV糖基化主要由N-连接的α-2,3唾液酸（MAL-I），O-连接的α-2,3唾液酸（MAL-II）和N-连接的α-2,6唾液酸（SNA）。并且还表达双触角聚糖和一些末端GalNAc（HPA）。
为了证实这些聚糖在EV上的表达，研究来自两种细胞系的膜囊泡对HPA，MAL-1，MAL-II，SNA，ConA，GNA和NPA的免疫反应性。与之前描述的小型EV的异质性以及小型EV的RNA，蛋白质和脂质含量一致。
在母细胞瘤的EV的表面上检测到唾液酸，它是众所周知的Siglecs免疫抑制受体家族的配体，因为DC以Siglec-1依赖性方式摄取T细胞衍生的EV，并且脾边缘区巨噬细胞摄取B细胞以Siglec-1依赖的方式衍生的EV，我们在EV制剂上筛选Siglec配体。我们将EV固定在固相上，并用重组Siglec-Fc构建体进行Siglec结合ELISA测定。我们测试了信号Siglecs（Siglec-3，-7，-9和-10）在moDC上的结合。在INFα刺激后，moDC上调Siglec-1，但由于该受体是没有信号传导特性的摄取受体，我们将其从筛选中排除。U87衍生的EV表达Siglec-9（CD329）的配体，而没有检测到Siglec-3，-7和-10的配体。Siglec-9是CD33相关的Siglec，可识别α-2,3或α-2,6中的唾液酸到半乳糖。Siglec-9主要在免疫细胞上表达，如NK细胞，T细胞，中性粒细胞，单核细胞和未成熟DC，并且具有两种基于细胞内免疫受体酪氨酸的抑制基序（ITIM）。
Reference:Glycan modification of glioblastoma-derived extracellular vesicles enhances receptor-mediated targeting of dendritic cells
PMID：31489145
如果觉得《胶质母细胞瘤细胞外小泡的糖基修饰增强受体介导的树突状细胞靶向性》对你有帮助，请点赞、收藏，并留下你的观点哦！
