前文回顾：三、Grail研究
Grail公司是肿瘤早期筛查的引领者，其NCT02889978研究是一个前瞻性的、多中心、纵向的、观察性研究。
研究设计：该研究对所有入组人员（包括非肿瘤患者和肿瘤患者）的ctDNA血液以及组内的肿瘤患者的组织样本分别进行基因检测。其中，对ctDNA血液样本开展靶向测序、全基因组测序、甲基化测序及转录组水平四个维度的基因测序；对肿瘤组织样本仅进行全基因组测序。研究人员计划对所有入组人员进行5年的随访，主要内容包括确诊为肿瘤患者的治疗，复发和死亡情况，以及非肿瘤患者发展为肿瘤的诊断、癌症状态、治疗和死亡的相关数据跟踪。研究方法：
研究中靶向测序深度60000X，有效的测序深度3000X，主要分析非同义突变SNVs和Indel；
WGS测序深度30X，主要分析拷贝数变异，已进行白细胞对照；
甲基化测序深度30X，未进行白细胞对照；
肿瘤组织，同样做白细胞对照。
图1 Grail研究设计图
研究结论（ ASCO数据）：
1）10种癌症敏感性大于55%（如图2）；
2）卵巢癌、肝癌、结直肠癌、食管癌、淋巴癌早筛较有前景；
3）初步研究显示，肺癌靶向测序早筛效果好。
图2 Grail早筛研究结果
肺癌早筛中甲基化研究结果（ ASCO会议）：
肺癌早筛中甲基化的研究是基于特异性（真阴/真阴+假阳）达99%的前提下，进行的敏感性（真阳/真阳+假阴）统计，结果显示：癌症早筛在癌症早期的敏感性依然不理想，肺癌Ⅰ期的敏感性仅为25%，其他癌种结果见图3；
在93.8%（735/784）的病例中，使用甲基化数据进行组织溯源，90.2%（663/735）的预测是正确的（图4）；
在组织溯源方面早期和晚期的结果没有差异，Ⅰ-Ⅲ期预测敏感性89.9%（384/427），Ⅵ期90.1%（255/283）（图5）。
图3甲基化早筛研究结果
图4 甲基化组织溯源结果
图5 不同分期检测敏感性、组织溯源
四、早筛在鼻咽癌中的研究
，新英格兰医学杂志报道过一篇通过荧光定量PCR方法检测EBV病毒，进行鼻咽癌早筛的研究。
经前期筛选，该研究共纳入20,174人，经过两次EBV病毒筛查，309人呈阳性，其中有9人拒绝下一步内窥镜或MRI检查；而在同意检查的300人中，又有25人因各种原因最终未进行检查。结果表明：在拒绝下一步检查的9人中 ，有1人在32个月后罹患鼻咽癌；接受检查的300人中，有34人被确诊为鼻咽癌。该方法在进行鼻咽癌早期筛查的敏感度可达97.1%，特异性达98.6%，阴性预测值更是高达99.995%，阳性预测值为11%：
敏感性：真阳/真阳+假阴=34/34+1=97.1%
特异性：真阴/真阴+假阳=19864/19864+274=98.6%
阳性预测值：真阳/真阳+假阳=34/34+274=11.0%
阴性预测值：真阴/真阴+假阴=19864/19864+1=99.995%
此研究有较高的敏感性、特异性以及阴性预测值，虽然阳性预测值差强人意，但此研究的意义在于经过EBV病毒筛查的人群检查出癌症处于早期的比例更多（Figure2.A），34名参与者在平均随访时间为24个月后，仅有1例患者在治疗后复发。经过鼻咽癌的早期筛查发现鼻咽癌患者3年无进展生存率优于历史数据（Figure2.B）。结果如下图所示：
实现肿瘤的早期筛查是所有科学家和临床工作者共同的梦想，相信随着技术的不断发展，未来会有更多新的检测项目和手段被提出，不久的将来，也会有更好的检测技术开启早诊早筛新时代。
参考文献
ASCO .
Chan K C A , Woo J K S , King A , et al. Analysis of Plasma Epstein–Barr Virus DNA to Screen for Nasopharyngeal Cancer[J]. New England Journal of Medicine, , 377(6):513-522.
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