肿瘤免疫逃逸简介
肿瘤免疫逃逸(Tumor Immune Escape) 是指，受多种因素影响， 使肿瘤细胞处于身体免疫监视的“死角”而逃避免疫系统的识别和攻击，得以在体内快速增殖的现象。造成肿瘤免疫逃逸的原因有二，其一是身体(宿主)的因素，即宿主免疫功能低下、免疫耐受、抗原提呈细胞(APC) 功能低下等，均不利于免疫系统杀伤肿瘤细胞，有助于肿瘤的免疫逃逸。另一原因则与肿瘤细胞本身有关，包括：
(1)肿瘤细胞表达抗原的缺失和调变：前者是指肿瘤细胞本身不表达“可诱发身体抗肿瘤免疫反应”的抗原性物质；后者则指受到免疫攻击后，肿瘤细胞表达的抗原减少或改变性质，以避免被免疫细胞杀伤。
(2)肿瘤细胞的漏逸：肿瘤细胞迅速生长，使身体的免疫系统不能有效且实时地清除大量生长的肿瘤细胞。
(3) 主要组织相容性复合体(MHC) 分子的表达下调或缺失：约有15%的肿瘤细胞会出现MHC突变或缺失， 而低表达或不表达MHC分子。此类肿瘤细胞不表达MHC-I或MHC-Ⅱ分子， 使肿瘤细胞无法有效呈现肿瘤抗原，进而能逃避细胞毒性T细胞(CTL) 或第一型Ｔ辅助细胞(CD 4+Th)的识别。
(4)协同刺激因子的缺乏：肿瘤细胞低表达或不表达协同刺激因子，使T细胞的活化缺乏第二激活信号因子
(5) 分泌免疫抑制因子：肿瘤细胞分泌转化生长因子-β(TGF-β) 和白介素-10(IL-10)等抑制因子，抑制身体的抗肿瘤免疫应答。
(6) 肿瘤细胞的“蒙面术”：一些肿瘤细胞会合成大量糖尊(Glycocalyx，富含唾液酸的黏脂多糖蛋白复合物)把自己包被起来，使抗体、补体及Ｔ细胞很难对其进行识别。
灵芝多糖促进黑色素瘤细胞MHC-I分子及协同刺激因子的表现
肿瘤抗原肽与肿瘤细胞表面的MHC-I分子结合形成复合物， 再与Ｔ细胞表面的抗原受体结合，才能活化Ｔ细胞，并杀伤肿瘤细胞，这一过程还需要B7-1、B7-2等协同刺激因子与Ｔ细胞表面的CD28分子结合。而恶性肿瘤细胞常表现为MHC-I分子和协同刺激因子的低表达或不表达，这是构成肿瘤免疫逃逸的机制之一。
近年来，我们团队的李卫东副教授、孙立新博士针对“灵芝多糖(G1-PS) 促进B16F10黑色素瘤细胞MHC-I分子和协同刺激因子的表达”进行了探讨：
B16F10黑色素瘤细胞不表达MHC-I、B 7-1、B 7-2等分子，或表达不足。RT-PCR检测结果显示，与RPMI 1640培养基对照组相比，不同浓度G1-PS(200、400、600ug/ml) 作用48h，能使B16F 10黑色素瘤细胞MHC-I分子H-2Kb和H-2DbmRNA表现增加，也能使协同刺激因子B 7-1和B 7-2mRNA表达增加。
以流式细胞仪检测的结果也显示，G1-PS可使H-2Kb、H-2Db、B7-1和B 7-2分子表达增强。此外， G1-PS作用的B16F10黑色素瘤细胞与PHA活化的小鼠脾淋巴细胞共同培养，淋巴细胞介导的抗B16F10细胞毒活性，较对照组明显提高。
综合以上结果可知，G1-PS有促进黑色素瘤细胞MHC-I分子和协同刺激因子表达的作用，并因此拮抗黑色素瘤细胞的免疫逃逸。
灵芝多糖抑制黑色素瘤细胞分泌免疫抑制因子
肿瘤细胞可产生多种免疫抑制因子，抑制免疫细胞的功能，逃避身体免疫系统的攻击。IL-10、TGF-β、血管内皮生长因子(VEGF) 是肿瘤细胞中常见的免疫抑制因子， 经酶联免疫吸附测定(ELISA) 方法检测，B16F10黑色素瘤细胞培养上清液中IL-10、TGF-B、VEGF浓度， 显著高于RPMI 1640培养基对照组， 说明B16F10黑色素瘤细胞可分泌这三种细胞因子。
在植物凝集素(PHA) 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应实验，加人B16F10黑色素瘤细胞培养上清液，可显著抑制淋巴细胞增殖反应，但如果同时加人G1-PS(0.2~12.8ug/ml)，则可使受抑制的淋巴细胞增殖活性、混合淋巴细胞反应和穿孔素表达显著增强，同时G1-PS(3.2ug/ml、12.8ug/ml)还能使受抑制的颗粒酶B表达增加。
结果表明，灵芝多糖可在一定程度拮抗B16F10黑色素瘤细胞培养上清液诱导的免疫抑制，这可能与灵芝多糖抑制B16F10黑色素瘤细胞分泌免疫抑制因子有关。
进一步研究发现， 实时RT-PCR检测结果显示，G1-PS可使B16F10黑色素瘤细胞的IL-10mRNA、TGF-β1mRNA、VEGF mRNA表达显著降低；ELISA结果也显示，G1-PS可使B16F10黑色素瘤细胞培养上清液生成IL-10、TGF-β1和VEGF的浓度显著减少。综合以上结果可知，灵芝多糖确实有抑制肿瘤细胞分泌免疫抑制因子的能力。
灵芝多糖拮抗黑色素瘤细胞培养上清液抑制巨噬细胞功能
李卫东、孙立新等的研究还发现，B16F10黑色素瘤细胞培养上清液，对巨噬细胞的抗肿瘤活性亦有抑制作用。在用LPS活化巨噬细胞时， 加人B16F10黑色素瘤细胞培养上清液，可抑制巨噬细胞的活化，但如果同时加人不同剂量的灵芝多糖(G1-PS)，则可拮抗这种抑制作用。
与未加灵芝多糖的对照组相比，G1-PS(0.2~12.8ug/ml)可使受抑制的巨噬细胞吞噬活性增强，G1-PS(12.8ug/ml)可使受抑制的巨噬细胞生成较多的TNF-α(肿瘤坏死因子-α) ，对于受抑制的TNF-α杀伤L 929肿瘤细胞之活性，G1-PS(0.2~12.8ug/ml)也有增强的作用。
灵芝多糖拮抗肺癌患者血浆诱导的淋巴细胞活性抑制作用
为了让研究结果更接近临床实践，李卫东、孙立新等与临床医生合作，取得尚未做任何常规肿瘤治疗的12例肺癌患者的血浆，观察肺癌患者血浆对正常人外周血淋巴细胞活性的抑制作用，以及灵芝多糖的干预作用。
将不同浓度的灵芝多糖加人受肺癌患者血浆抑制的正常人外周血淋巴细胞，再用植物凝集素(PHA) 活化淋巴细胞，结果发现，与未加灵芝多糖的对照组相比，G1-PS(3.2、12.8ug/ml)可显著增强受抑制的淋巴细胞表面抗原CD69的表达，G1-PS(0.2~12.8ug/ml)可显著改善受抑制的淋巴细胞增殖活性，G1-PS(0.2~12.8pg/ml)可明显提高受抑制的淋巴细胞穿孔素(Perforin) 和颗粒酶B的表达。后两者均为T淋巴细胞产生的杀伤肿瘤细胞之活性成分。
结论
以上研究结果表明， 灵芝多糖可以通过促进黑色素瘤细胞MHC-1分子和协同刺激因子B7-1与B7-2的表达，以及抑制黑色素瘤细胞分泌免疫抑制因子IL-10、TGF-β、VEGF， 增强淋巴细胞与巨噬细胞杀伤肿瘤细胞的活性，使黑色素瘤无法逃脱免疫系统的攻击。灵芝多糖拮抗肺癌患者血浆诱导的淋巴细胞活性抑制作用，更扩大了灵芝多糖抑制肿瘤免疫逃逸的应用范围。
参考文献
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(原载：《健康灵芝》，第64期6~8页和第65期2~3页)
*注：灵芝多糖为灵芝子实体的热水提取物，和灵芝三萜并列为灵芝的两大标志性成。
资料来源：《灵芝纵横谈》
作者：林志彬（Iin zhi Bin）
祖籍福建闽侯，原北京医科大学基础医学院副院长兼基础医学研究所所长、药理学系主任，北京医科大学副校长。长期从事抗炎症药、免疫调节药、内分泌药和抗肿瘤药的药理作用和作用机制研究，专注灵芝药理研究40余年，是国内外著名的灵芝研究学者。
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