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“国药动保”推荐阅读【猪场兽医】一例猪场猪伪狂犬病的控制及处理

时间:2018-10-04 14:00:16

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“变异”猪伪狂犬病在全国范围内大量暴发,表现为接种传统Bartha-K61株疫苗免疫的猪只,不能有效阻止病毒感染(gE抗体转阳)。同时猪伪狂犬病各种特征性临床症状明显,造成猪场持续的、巨大的经济损失。文章介绍一例发生在云南省临沧市一养猪场的猪伪狂犬病例,该猪场基础母猪存栏500头,一点式自繁自养。

笔者从该例猪伪狂犬病的确诊、筛选适合的疫苗毒株、最后确定净化方案等方面做陈述,以供同行参考。

关键词

猪伪狂犬病;gE抗体;疫苗毒株;净化方案

猪伪狂犬病(Pseudorabies)是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的传染性疾病,猪是PRV的贮存宿主之一。临床症状表现为出现神经症状的3周龄内仔猪大量死亡;后期仔猪及育肥猪伴随呼吸道症状;怀孕母猪表现为高流产率和死胎。

gE基因自然缺失的Bartha-K61株活疫苗在猪场伪狂犬病防控中得到广泛应用。但以来,我国伪狂犬病毒野毒发生变化。从我国华东地区开始,越来越多的接种Bartha-K61株免疫猪场,种猪群gE基因检测转阳,各猪群临床病征凸显。同时,国内分离的经基因工程方法人工致弱的SA215株、HB-98、HB-2000及国内分离天然致弱的C株疫苗在猪场中得到更多地运用。

1 材料与方法

1.1 样本来源

样品来源于云南省临沧市某猪场。该猪场自8月开始至3月,母猪月分娩率在71.4%~78%之间,月产房死胎、木乃伊胎及畸形胎的占比在16.95%~31.5%之间,月产房死淘率在19.4%~42.8%。保育期正品率94.4%~95.2%。育肥期正品率95.1~95.6%。自7月感染发病后,生产数据最差出现在9月、10月、11月、12月,而后整场生产成绩逐渐好转。发病主要见于种猪群及产房哺乳猪。

3月,分娩母猪91窝,窝均总仔数13.19头,窝均活仔数10.90头。死胎及木乃伊胎占比17.36%。母猪流产3头,3窝均从流产胎儿中检出PRV抗原。配种母猪105头,返情18头。全月死/淘产房仔猪58头、保育仔猪55头、育肥猪46头。

1.2 检测试剂

检测用试剂盒,由云南牧创生物科技有限公司赞助提供,试剂盒品牌见表1。

1.3 诊断方法

1.3.1 流行病学调查

该猪场于1月至4月有猪传染性胃肠炎-流行性腹泻病史。于7月从江苏某种猪场引进种猪125头后,出现猪伪狂犬病感染发病。

1.3.2 临床症状

哺乳仔猪感染后表现为体温发热(大于41℃)及神经症状,震颤、共济失调及角弓反张。有些病猪因呼吸困难呈犬坐式呼吸,有的转圈或者侧卧做划水动作,同时伴随呕吐及腹泻。发病断奶仔猪体温发热(大于41℃),一般伴有呼吸道症状,表现为打喷嚏、呼吸困难及咳嗽,如发生神经症状,则病死率大于90%。母猪主要表现为繁殖障碍,分娩率低,死胎、木乃伊胎及弱仔比例高。育肥中、大猪主要表现呼吸道症状,部分猪伴随支原体肺炎、传染性胸膜肺炎的感染,呼吸道症状加重甚至死亡。

1.3.3 剖检变化

病死哺乳仔猪及断奶仔猪可见坏死性扁桃体炎,脑可见出血及非化脓性脑炎,肝脏、脾脏及肾脏可见灰白色或黄白色坏死灶。流产胎儿及新生哺乳猪可见肝脏及脾脏的坏死灶,肺脏及扁桃体出血灶。

1.3.4 实验室诊断方案

对各阶段猪只血清抗体进行检测,经产母猪1~2胎龄10头,3~4胎龄10头,5~6胎龄10头,大于等于7胎龄10头。公猪全部采样。自留配前后备猪(35周龄以上)全部采样。同时分别对2周龄、4周龄、7周龄、10周龄、13周龄、16周龄、20周龄、24周龄和30周龄商品猪采样,每组10头。抗体检测项目包括:猪伪狂犬病gE基因抗体、猪伪狂犬病gB基因抗体、猪瘟抗体、猪蓝耳病抗体、猪圆环病毒病抗体、口蹄疫O型抗体及口蹄疫A型抗体。

对一个月内的流产胎儿或脐带血进行猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病、猪细小病毒病、猪乙型脑炎抗原检测。对死、淘猪进行猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病抗原检测。

2 结 果

2.1 实验室诊断结果

通过血样普检,经产母猪gE抗体阳性率100%,公猪gE抗体阳性率53.84%。说明全群经产母猪已被伪狂犬病野毒感染,大部分处于潜伏感染状态,部分猪只如遇应激因素或其他疾病不稳定的状态下,伪狂犬病野毒再次活跃致病。各阶段死、淘猪中的几种疑似抗原阳性检出率见表2。

猪伪狂犬病抗原在猪场各阶段死、淘商品猪和流产胎儿脐带血中均有不同比例的检出,检出率符合猪伪狂犬病在猪场猪群中的流行病学规律。

2.2 数据分析结果

该猪场防疫意识较强,使用疫苗的生产厂家见表3。

从血清普查结果看,口蹄疫、猪瘟、猪细小病毒病、猪乙型脑炎均处于较理想的免疫状态。该猪场猪蓝耳病未做免疫,各阶段猪蓝耳病S/P平均值均小于1.5,猪蓝耳病抗体阳性率为81.71%。但保育及育肥阶段猪只S/P值变异系数较大。说明各阶段猪只出现猪蓝耳病不稳定属于继发性的不稳定。综上,猪伪狂犬病仍然是导致猪场各区间不稳定,生产指标低下的主要因素。

3 处理方法

3.1 商品猪伪狂犬病疫苗毒株对比及筛选

疫苗对比试验共分3组,选择连续1周内分娩的(约20窝)母猪及该窝仔猪作为试验组1,免疫SA215株猪伪狂犬病活疫苗;而下一周分娩的母猪及该窝仔猪作为试验组2,免疫C株猪伪狂犬病活疫苗;再下一周分娩的母猪及该窝仔猪作为试验组3,免疫Bartha-K61株活疫苗。试验猪只除猪伪狂犬病疫苗程序(见表4)调整外,其他饲养管理按猪场原生产程序执行。

疫苗免疫及抽血均安排在周四进行。各组商品猪分别在2周龄、4周龄、7周龄、10周龄、13周龄、16周龄、20周龄、24周龄时,随机抽样20头,检测gE,gB抗体。各阶段死、淘猪只均用实时荧光定量PCR方法检测PRV。

记录各试验组的分娩时间,母猪耳号,初生总仔数,初生活仔数,木乃伊胎,死胎,断奶数,保育转出数,育肥出栏数。死/淘猪只PRV阳性检出率。理想的疫苗接种后应阻断效果好、各阶段成活率/正品率高。

3.2 种猪净化方案

免疫程序:经产母猪及公猪每年全群3次免疫,每4个月1次;后备猪配种前2次免疫,间隔3周,配种后同经产母猪一同免疫;商品猪出生后0-1d滴鼻,6周一免,9周二免。

gE抗体阳性公猪一次性淘汰。补充gE抗体阴性公猪。设置试情专用公猪,配种只使用人工授精,严禁本交。

周批次断奶时,对经产母猪按照种猪淘汰标准进行逐步淘汰。对gE抗体检测阴性后备猪才予以留用配种。在控制gE抗体阳性猪只处于不排毒、不发病的潜伏感染状态的同时,对商品猪只高密度免疫,产生抗体有效阻断病毒感染。通过不断淘汰gE抗体阳性猪,补充gE抗体阴性后备猪,降低种猪群gE阳性率。

每年4月及11月进行血清抗体普查,其中1-2胎母猪按30%采样。其他胎龄经产母猪按10%采样,公猪全检。持续约3年时间。

待全群gE抗体阳性率降到10%以下时,进行全群种猪gE抗体全群检测,一次性淘汰gE抗体阳性猪只,从而达到猪场种猪猪伪狂犬病净化的目的。

4 处理效果及分析

4.1 不同毒株猪伪狂犬病疫苗免疫效果对比

在商品猪伪狂犬病疫苗效果对比过程中,gE抗体检测结果见表5。

试验组2在16周龄及24周龄出现0%的阳性率,说明虽然母猪是感染阳性,但Bartha-K61疫苗免疫产生的抗体有一定阻断作用,病毒并未垂直传播,gE抗体阳性的母猪可以生下gE抗体阴性的个体。且出现死胎、死胎检出猪伪狂犬病抗原阳性的仔猪也不一定该窝猪整窝都被感染。

如果疫苗毒株与发病野毒毒株匹配,疫苗抗体能有效阻断猪只后期感染。让同场自留后备猪筛选gE阴性后,进行种群更新成为可能。而不匹配毒株免疫后,抗体并不能有效阻止野毒的感染。但gE转阳并不等同发病,但从各生产车间的正品率对比看,gE抗体阳性的猪群发病风险明显大于gE抗体阴性的猪群。

从gB抗体的阳性率(见表6)及抗体滴度平均值(见表7)看出,母猪免疫后,母源抗体持续保护仔猪到4周以上,7周检测值为疫苗抗体,但试验组1在第10周,试验组3在第13周,可发现抗体滴度值快速升高,说明在相应时期,不仅有疫苗产生的疫苗保护抗体,也同时有野毒感染产生的抗体。

而同样滴鼻后两次免疫的试验组2,后期猪群没有抗体滴度值的突然升高,说明试验组2选用的疫苗免疫程序能成功阻断后期野毒的感染。gB抗体检测结果与gE抗体检测结果相对应。

各组生产数据对比(见表8),试验组2的各阶段正品率优于其他两组。说明试验组2选用的C株疫苗,阻断效果或保护力从抗体血检指标及实际生产指标均优于Bartha-K61及SA215毒株疫苗。

4.2 种猪净化方案及执行效果

猪场9月27日、10月25日、2月28日进行经产母猪群及公猪的全群C株伪狂犬疫苗免疫。4月12日血清普检猪伪狂犬病抗体数据(见表9)。

疫苗高密度免疫后,能有效阻断病毒在后期的感染,母源gE阳性抗体衰减较以前提前,可能说明gE抗体阳性母猪注射疫苗能降低野毒在体内的活跃度,缓解症状。新补充的一胎母猪gE抗体无转阳。种猪阳性率持续下降符合预期。4月,不正常胎儿比例5.22%,产房正品率95.67%,保育正品率98.48%。结果说明,猪场净化方案及实施效果达到了预期的目的。

5 总 结

1)猪场引种仍然是导致新野毒进入的主要途径。引种前应充分做好疫病筛查。引种后进行隔离驯化。

2)选择合适的合作实验室是必要的,精准的实验室数据为猪场重大事项正确决策、疫病早期预警,快速控制及清除提供依据。

3)同种病毒不同毒株间的差异有大有小。差异较大的如口蹄疫、猪蓝耳病、猪伪狂犬病等。选择和发病野毒亲缘性较近的毒株疫苗免疫,效果比亲缘性较远的毒株疫苗效果好。选择何种疫苗以“试用”的临床数据对比结果为准。

4)猪场疫病防控是个持续、繁杂、系统的工程。详细准确的生产报表,持续性的实验室检测档案的建立也是必要的。数据能作为预估疫病风险、快速确诊、制定方案及评估方案效果的最直接依据。

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